人抗心肌抗體酶聯(lián)免疫試劑盒說明書 規(guī)格：96T/48T 特點：靈敏性高，性，吸附均勻，吸附性好，回收利用率高，是一款可以讓您放心選購的抗心肌抗體IgM(HRAb IgM)酶免ELISA試劑盒產(chǎn)品。 使用范圍：此產(chǎn)品供科研實驗使用，不得用于臨床。 用途：用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。 具體保質(zhì)期請見試劑盒外包裝標簽。請在保質(zhì)期內(nèi)使用試劑盒。聯(lián)系時請?zhí)峁┊a(chǎn)品貨號、生產(chǎn)日期（見盒簽），以便我們更高效為您服務(wù)。 【試劑盒特點】 1.專一性強?？乖c抗體的反應是專一反應，而酶技術(shù)以反應為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的反應特性并無多大差別。 2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射測定法。 3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。 4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。 5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應用酶免吸附技術(shù)進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行酶技術(shù)的定量測定。 6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。 7.儀器和試劑簡單。對沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應用單位均易購置. 穩(wěn)定性：2℃-8℃保存，有效期 6 個月。 樣品收集、處理及保存方法 1）血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 3）細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液 5）保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 試劑的準備 1）標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。 2）洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。 操作注意事項 1）試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。 2）實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。 3）不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 4）使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。 5）使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 6）洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。 7）底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。 8）加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。 9）按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 操作步驟 1）使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。 2）根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。 3）加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。 4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。 5）每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。 6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。 7）每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。 8）取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。 9）在450nm波長處測定各孔的OD值。 局限 6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到精確的結(jié)果。 試劑盒性能 1. 靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。 2. 特異性：不與其它細胞因子反應。 3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。 結(jié)果判斷與分析 1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值 2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的待測物質(zhì)標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的待測物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
|
